在 GB 5009.296—2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》于 2024 年 3 月 6 日替代 GB 5009.82—2016 中维生素D相关方法后，食品中 25-羟基维生素D₂(25-OH VD₂，CAS 21343-40-8)与 25-羟基维生素D₃(25-OH VD₃，CAS 19356-17-3)的 LC-MS/MS 定量成为实验室标配。天津阿尔塔科技(First Standard®)作为国产稳定同位素标记物与标准品头部厂商，其维生素系列里围绕"25-OH VD₂ / 25-OH VD₃ + 氘代内标"给出的配套链路，基本覆盖了从食品到临床血清的两类场景。
一、为什么 25-OH VD 检测离不开"双标 + 氘代内标"
维生素D本身在体内半衰期短，临床与食品营养评价真正看的是其首要代谢物 25-OH VD₂/D₃。这类分子有三个典型痛点：
光不稳定性强：醇溶液需避光、-20℃ 以下保存，前处理最好在黄光下操作；
基质效应大：乳粉、婴幼儿配方食品、血清中脂类干扰重，必须走同位素内标校正；
VD₂ 与 VD₃ 异构体分离难：依赖 C18 柱甲醇-水/甲酸体系梯度，内标若不用同结构氘代物，回收率会漂。
GB 5009.296—2023 正文给出的架构是：维生素D₂、D₃ 单标储备液 → 混合标准使用液 → 加 VD₂-d₃ / VD₃-d₃ 混合内标使用液 → 甲醇定容工作曲线。 阿尔塔的配套思路就是照这条线把"国产纯品 + 乙醇/甲醇溶液标 + 自研氘代内标"三件套补齐。
二、阿尔塔 25-OH VD 产品矩阵拆解
1. 非标记主体标准品（单标/溶液）
乙醇中 25-羟基维生素D₂ 溶液，100 μg/mL，1 mL 安瓿，货号 1ST1572-100Y-1ML，CAS 21343-40-8；
乙醇中 25-羟基维生素D₃ 溶液(对应 CAS 19356-17-3)，同浓度档可选；
维生素D₂、D₃ 本体纯品及乙醇中 100 μg/mL / 1000 μg/mL 溶液，用于做皂化前的总 VD 折算或方法比对。
溶剂统一走乙醇中而非甲醇中，贴合 GB 5009.296 对 25-OH VD 溶解性的要求，也方便直接稀释进甲醇体系工作液。
2. 稳定同位素标记内标（阿尔塔自研重点）
阿尔塔公开披露已打通 25-OH VD₂-D₃、25-OH VD₃-D₃、25-OH VD₂-D₆、25-OH VD₃-D₆ 的合成工艺，并按 RM 标准做了均匀性/稳定性研究。 对应 GB 5009.296 正文要求的"VD₂-d₃(2.00 mg/L)+ VD₃-d₃(1.00 mg/L)混合内标使用液"，阿尔塔可提供：
乙醇或甲醇中 VD₂-d₃ 单标(如 100 μg/mL)；
乙醇或甲醇中 VD₃-d₃ 单标；
按国标比例预混的 VD₂-d₃ / VD₃-d₃ 混合内标使用液，开瓶稀释即用。
氘代位点选在 6,19,19 位(如 VD₂-6,19,19-D₃，货号 1ST1573-100Y 同类体系)，保证保留时间几乎重合、质谱响应因子稳定，又不会在 ESI+ 模式与本体峰共享定量离子。
3. 维生素大包装与混标延伸
在 First Standard® 维生素产品线里，A、D₂、D₃、E、K₁、B 族纯品及溶液成系列，25-OH VD 单标可单独采购，也可走"维生素D族 LC-MS/MS 校准包"形式(含 VD₂、VD₃、25-OH VD₂、25-OH VD₃、VD₂-d₃、VD₃-d₃ 六支)。对同时做 GB 5009.82(VADEK)、GB 5009.158(VK₁)、GB 5009.296 的实验室，直接拿维生素系列大目录按货号拼单更划算。
4. 临床血清场景的延伸
虽然 GB 5009.296 是食品标，但阿尔塔在第四届北京临床质谱论坛展示过同源 25-OH VD 氘代内标，可对接临床血清试剂盒(蛋白沉淀+萃取+复溶方案)。食品实验室若兼做体检中心送检血清，同一批 25-OH VD₂/D₃ 单标 + d₃ 内标可跨方法复用，只是校准曲线介质从甲醇换成血清空白提取液。
三、按 GB 5009.296 落地的配制路径(阿尔塔物料视角)
以乳粉中 25-OH VD₂/D₃ 检测为例，用阿尔塔物料走一遍：
储备液：取 1ST1572-100Y(乙醇中 25-OH VD₂ 100 μg/mL)和同档 25-OH VD₃ 各 1 mL，按标准反推用乙醇稀成 1000 μg/L 级混合储备；避光 -20℃ 存。
混合标准使用液：吸储备液用甲醇定容到标准规定的 VD₂ 2000 μg/L、VD₃ 1000 μg/L 档(对应 GB 5009.296 的 17.4.5 条)。
混合内标使用液：取阿尔塔 VD₂-d₃、VD₃-d₃ 单标，甲醇定容成 VD₂-d₃ 2.00 mg/L + VD₃-d₃ 1.00 mg/L 混合液(-20℃ 避光，1 个月效期)。
标准系列工作液：6 点曲线(VD₂: 20/40/100/200/300/400 μg/L，VD₃: 10/20/50/100/150/200 μg/L)，每点加 1 mL 混合内标使用液，甲醇定容，临用配。
样品侧：样品皂化(KOH-乙醇，≤60℃)→ 正己烷萃取 → C18 SPE 净化 → 复溶时加入与曲线等量的 d₃ 内标混合液 → LC-MS/MS(C18 2.1×100 mm，甲醇-0.1%甲酸水梯度，ESI+)。
全程黄光操作，标液瓶铝箔包裹，避免 25-OH VD 光解导致曲线低点塌方。
四、选阿尔塔这套方案的几个实际理由
氘代内标国产化替代：过去 25-OH VD-d₃ 靠进口大厂，阿尔塔自研后价格显著下探，丰度与还原度评审数据可比进口，适合批量送检的第三方食品实验室；
溶剂与国标对齐：主体标给乙醇中、内标可指定甲醇中，不用自己转溶引入误差；
证书链完整：每支带 CoA(HPLC/LCMS/NMR/UV 质控)、ISO17034/ISO17025 体系背书，CMA/CNAS 归档直接可用；
货号稳定：1ST15xx 系列在仪器信息网、阿尔塔持续在售，换批不换号，SOP 不用重写。
五、常见踩坑提醒
别把"维生素D₃ 本体标"当"25-OH VD₃"用——两者 CAS、母离子不同(VD₃ 397.3，25-OH VD₃ 413.3)，混用曲线全废；
d₃ 内标别用 D₆ 硬替，GB 5009.296 明文写 d₃，换标记数要重做回收验证；
乙醇中单标开瓶后效期按厂家 6–12 个月，但配成甲醇工作液后按国标"临用前配制"，不要提前一周稀好放自动进样器过夜；
血清方法转食品方法时，内标浓度要按食品标重算，别直接抄临床试剂盒的 5 μg/L 内标恒浓度。
小结
阿尔塔科技在 25羟基维生素D检测上的配套，本质是"乙醇中 25-OH VD₂/D₃ 单标 + 自研氘代 VD₂-d₃/VD₃-d₃ 内标 + 维生素大系列纯品"的组合拳，既能无缝对接 GB 5009.296—2023 的 LC-MS/MS 外标-同位素内标架构，也能向下兼容临床血清 25-OH VD 质谱试剂盒。对食品检测实验室来说，按 1ST1572 系列主体标 + 指定 d₃ 内标货号采购，再严格走"乙醇储、甲醇稀、黄光配、低温存"，整套量值溯源链就立得住了。
您的位置：
更新时间：2026-07-31 
浏览次数：17
